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為什么很多研究人員更喜歡用多克隆抗體進(jìn)行IHC/IF實(shí)驗(yàn)?
發(fā)表者：北京博奧森生物 發(fā)表時(shí)間：2020-2-27
單克隆抗體和多克隆抗體都廣泛應(yīng)用于IHC/IF檢測(cè)。然而，與多克隆抗體相比，某個(gè)單克隆抗體的使用效果，在不同的樣品中可能存在顯著的差異。揭示這種表象背后的原因，將是一件很有趣的事情。
我們都知道，在IHC/IF樣品制備的過程中，生物樣本的抗原性將面臨巨大的挑戰(zhàn)，尤其是
石蠟包埋樣品?；瘜W(xué)試劑以及不良的物理?xiàng)l件可以很容易地破壞或阻斷目標(biāo)蛋白(抗原)中的某些抗原表位。一旦某個(gè)特定的抗原決定簇在IHC/IF樣品制備過程中被破壞，其專一性的單克隆抗體將失去檢測(cè)到這個(gè)抗原的機(jī)會(huì)，從而造成假陰性的結(jié)果。相比之下，多克隆抗體能夠在同一抗原上識(shí)別多個(gè)表位，即使在某一表位特性喪失的情況下，目標(biāo)蛋白上的其它抗原表位仍然可能被抗體識(shí)別，從而表現(xiàn)出完美的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。此外,高質(zhì)量的多克隆抗體由多種抗體分子組成，它們分別識(shí)別抗原上的一系列抗原表位。當(dāng)進(jìn)行IHC/IF檢測(cè)時(shí)，每個(gè)抗原分子可以結(jié)合多個(gè)不同的抗體分子，在檢測(cè)結(jié)果中顯示出很強(qiáng)的信號(hào)，從而極大的提高抗原檢測(cè)的靈敏度。
此外，自然界中的許多蛋白質(zhì)，由于表達(dá)過程中存在的剪切差異，有不同的變形體存在。如果某個(gè)蛋白表位并不是均一性的存在于所有變形體中，其特異性單克隆抗體就無法識(shí)別所有的蛋白變形體。這一限制將直接影響對(duì)于該蛋白質(zhì)家族的功能及作用的整體研究。顯而易見，多克隆抗體具有識(shí)別多個(gè)抗原表位的特性，在IHC/IF試驗(yàn)中，受到這種限制的影響較小，其抗原檢測(cè)的表現(xiàn)就會(huì)更好，體現(xiàn)出優(yōu)良的抗原檢測(cè)靈敏度。
綜上所述，鑒于多克隆抗體整體上具有較高的抗原識(shí)別靈敏度，經(jīng)驗(yàn)豐富的科學(xué)家們?cè)贗HC/IF檢測(cè)中更喜歡使用多克隆抗體，而非單克隆抗體。
Bioss提供經(jīng)過驗(yàn)證的多克隆抗體，以支持科學(xué)研究，其中許多產(chǎn)品已在科學(xué)雜志上報(bào)道。
盡管有前面的討論，許多優(yōu)質(zhì)的單克隆抗體在IHC/IF應(yīng)用中依然有良好的表現(xiàn)。因此，當(dāng)你在決定使用單克隆抗體還是多克隆抗體時(shí)，必須考慮具體的實(shí)驗(yàn)條件和目的。下面我們就來總結(jié)一下每種抗體的優(yōu)缺點(diǎn)。
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